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  • 产品名称:大肠杆菌k88ac抗体(E.coli k88ac Ab)ELISA试剂盒
  • 产品价格:面议
  • 产品产地:中国大陆
  • 访问次数:537 发布时间:2019/11/25 9:29:30
  • 简介内容:大肠杆菌k88ac抗体( k88ac Ab)ELISA试剂盒 $r$n实验类型:夹心法$r$n试剂盒规格:48T/96T$r$n有效期:6个月$r$n保存条件:2-8℃$r$n应用范围:血清、血浆、组织匀浆、细胞培养物上清或其它相关液体(本产品仅供实验室科研及非临床用途)
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详细内容

大肠杆菌k88ac抗体(E.coli k88ac Ab)ELISA试剂盒

大肠杆菌k88ac抗体(E.coli k88ac Abelisa试剂盒检测原理
试剂盒采用双抗夹心法测定标本小鼠大肠杆菌k88ac抗体(E.coli k88ac Ab)表达。用纯化的抗原包被微孔板,制成固相抗可与样品中大肠杆菌k88ac抗体(E.coli k88ac Ab)相结合,经洗涤除去未结合的抗体和其他成分后再与HRP标记的抗原结合,形成抗原-抗体-酶标抗原复合物,经过彻底洗涤后底物TMB显色。TMBHRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成*终的黄色。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),与CUTOFF值相比较,从而判定标本中小鼠大肠杆菌k88ac抗体(E.coli k88ac Ab)的存在与否。

样品收集、处理及保存方法
1.  血清:使用不含热原和内毒素的试管,操作过程中避免任何细胞刺激,收集血液后,3000转离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。
2.  血浆:EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。3000转离心30分钟取上清。
3.  细胞上清液:3000转离心10分钟去除颗粒和聚合物。
4.  组织匀浆:将组织加入适量生理盐水捣碎。3000转离心10分钟取上清。
5.  保存:如果样本收集后不及时检测,请按一次用量分装,冻存于-20℃,避免反复冻融,在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。
自备物品
1.酶标仪(450nm
2.高精度加样器及枪头:0.5-10uL2-20uL20-200uL200-1000uL
3.37℃恒温箱
操作注意事项
1.  试剂盒保存在2-8℃,使用前室温平衡20分钟。从冰箱取出的浓缩洗涤液会有结晶,这属于正常现象,水浴加热使结晶完全溶解后再使用。
2.  实验中不用的板条应立即放回自封袋中,密封(低温干燥)保存。
3.  浓度为0S0号标准品即可视为阴性对照或者空白;按照说明书操作时样本已经稀释5倍,*终结果乘以5才是样本实际浓度。
4.  严格按照说明书中标明的时间、加液量及顺序进行温育操作。
5.  所有液体组分使用前充分摇匀。

大肠杆菌k88ac抗体(E.coli k88ac AbELISA试剂盒组成

1

30倍浓缩洗涤液

20ml×1

7

终止液

6ml×1

2

酶标试剂

6ml×1

8

阳性对照

0.5ml×1

3

标包被

12孔×8

9

阴性对照

0.5ml×1

4

样品稀释液

6ml×1

10

说明书

1

5

显色剂A

6ml×1

11

封板膜

2张  

6

显色剂B

6ml×1/

12

密封袋

1

注:标准品浓度都不相同,麻烦联系客服索取相应说明书
试剂的准备
20×洗涤缓冲液的稀释:蒸馏水按120稀释,即1份的20×洗涤缓冲液加19份的蒸馏水。
大肠杆菌k88ac抗体(E.coli k88ac AbELISA试剂盒洗板方法
1.  手工洗板:甩尽孔内液体,每孔加满洗涤液,静置1min后甩尽孔内液体,在吸水纸上拍干,如此洗板5次。
2.  自动洗板机:每孔注入洗液350μL,浸泡1min,洗板5次。

操作步骤
1.编号:将样品对应微孔按序编号,每板应设阴性对照2孔、阳性对照2孔、空白对照1孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)

2.加样:分别在阴、阳性对照孔中加入阴性对照、阳性对照50μl。然后在待测样品孔先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀,

3.温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟   

4.配液:将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用

5.洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。

6.加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外

7.温育:操作同3

8.洗涤:操作同5

9.显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色10分钟.

10.终止:每孔加终止50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)

11.测定:以空白孔调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值) 测定应在加终止液后15分钟以内进行。


结果判断
  试验有效性:阳性对照孔平均值1.00; 阴性对照平均值0.20

  临界值(CUT OFF)计算:临界值=阴性对照孔平均值+0.15

  阴性判定:样品OD< 临界值(CUT OFF)者为小鼠大肠杆菌k88ac抗体(E.coli k88ac Ab阴性

  阳性判定:样品OD 临界值(CUT OFF)者为小鼠大肠杆菌k88ac抗体(E.coli k88ac Ab阳性
 
试剂盒性能
1. 准确性:标准品线性回归与预期浓度相关系数R值,大于等于0.9900
2. 灵敏度:检测浓度小于(参考说明书)
3. 特异性:不与其它可溶性结构类似物交叉反应。
4. 重复性:板内、板间变异系数均小于15%
5. 贮藏:2-8℃,避光防潮保存。
6. 有效期:6个月

上海润裕生物科技有限公司科技有限公司,主要销售常用抗原抗体、试剂、Elisa试剂盒、生化试剂盒、免疫检测试剂盒、金标试剂盒、金标检测卡、动物血清、血浆、全血、抗血清、毒素类标准品、生物试剂、培养基、实验室仪器耗材、化学试剂、生物制品、标准品、对照品、生化免疫制品、免疫亲和柱、菌株、质粒、室内质控品、细胞、培养基、PEG、病理染色液、免疫学试剂、蛋白组学试剂、细胞生物学试剂、分子生物学试剂、抑制剂、细胞因子等。上海润裕生物科技有限公司时刻谨记产品质量,正如公司名一样,达到专业规格,纯度保证的质量生命线。公司秉承客户为天,质量为根,诚信为本,创新为魂的信念,将以优质的产品,完善的服务,为每一位客户的实验保驾护航。
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更新时间:2024/1/3 12:03:56

标签:大肠杆菌k88ac抗体(E.coli   k88ac   Ab)ELISA试剂盒   

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